에탄올 등급에 대한 개요와 올바르게 사용하는 방법에 대한 몇 가지 중요한 규칙이 있습니다. 에탄올은 미생물학에서 여러 용도로 사용됩니다. 생체 분자의 정제 및 침전, 조직학의 표본 염색 및 유지, 포매 전 조직 탈수 및 소독에 사용됩니다. 실험실에서 일반적으로 사용되는 세 가지 등급의 에탄올이 있습니다.
95%(95.6%) 에탄올
이것은 95.6% 에탄올이 공비혼합물이기 때문에 증류로 얻을 수 있는 가장 높은 에탄올 농도입니다.
절대(99–100%) 에탄올
물의 존재에 민감한 일부 절차에는 절대 에탄올이 필요합니다. 95%보다 높은 농도의 에탄올을 생산하는 일반적인 방법은 공비 구성을 방해하고 추가 증류를 허용하는 첨가제를 사용하는 것입니다. 이러한 이유로 무수 에탄올에는 때때로 이러한 첨가제(예: 벤젠)가 미량 포함됩니다.
절대 에탄올은 흡습성(물을 끌어당김)이므로 뚜껑을 닫지 않은 상태로 오랫동안 '100%' 에탄올로 남아 있을 것으로 기대하지 마십시오.
변성 에탄올
변성 에탄올(95% 또는 절대)에는 마시기 안전하지 않게 하여 특정 음료세가 면제되는 첨가제(예: 메탄올 및 이소프로판올)가 포함되어 있습니다. 이것은 순수한 에탄올보다 저렴합니다. 모든 에탄올 등급 중에서 이것은 실험실에서 소독에 가장 많이 사용하는 등급입니다.
분자생물학을 위한 에탄올
핵산을 침전 시킬 때 변성 에탄올을 사용해서는 안 됩니다 . 일부 첨가제는 다운스트림 적용을 방해할 수 있기 때문입니다. 첨가제가 생산자마다 다르기 때문에 예측하기가 약간 까다롭지만 변성 에탄올을 완전히 피하는 것이 가장 안전합니다.
95% 또는 100%의 비변성 에탄올을 사용할 수 있지만 형광 표지된 핵산으로 작업할 때 잔류 벤젠으로 인한 배경 형광을 피하기 위해 절대 에탄올을 사용하지 않습니다.
소독용 에탄올
비용의 상당한 차이를 제외하고는 소독에 사용하는 에탄올 등급이 중요하지 않으므로 대부분의 실험실에서는 변성 스톡을 사용합니다. 중요한 것은 최종 에탄올 농도입니다. 에탄올은 70%에서 90% 사이의 농도에서 효과적인 소독제입니다.
직관적이지 않은 것처럼 보일 수 있지만 70% 에탄올이 가장 효과적인 농도인 것 같습니다. 90% 에탄올은 단백질을 응고시키고 생성된 단백질 층이 효과적으로 세포를 휴면 상태로 만들기 때문입니다.
그러나 70% 농도에서 에탄올은 증발하는 데 더 오랜 시간이 걸리며 이 더 긴 접촉 시간은 세포에 더 효과적으로 침투할 수 있음을 의미합니다. 70% 등급의 물도 단백질을 변성시키는 데 중요합니다. 그리고 70% 에탄올도 저렴하고 인화성이 낮은 경향이 있습니다. (이것은 모두 상대적이며 여전히 매우 가연성입니다!)
그러나 에탄올을 희석할 때 주의해야 할 몇 가지 사항이 있습니다.
첫째, 희석된 에탄올은 더 이상 공비혼합물이 아니므로 증발 손실로 인해 에탄올 농도가 점차적으로 감소합니다. 70% 에탄올의 밀봉되지 않은 비커가 '작동을 멈춘' 경우 놀라지 마십시오.
둘째, 에탄올/물 혼합물에는 추가 부피가 없습니다. 즉, 무수 에탄올로 1리터의 70% 에탄올을 만들려면 700ml의 에탄올과 300ml의 물을 섞어서 만들 수 없습니다. 올바른 방법은 700ml의 에탄올을 측정한 다음 물로 1리터의 부피로 만드는 것입니다.
소실량 이해 : 물과 에탄올 혼합물에 가산량이 없는 이유
에탄올/물 혼합물에 첨가제 부피가 없는 이유는 무엇입니까? 이것은 두 부분으로 된 답변입니다.
- 물 분자는 서로 수소 결합을 형성하여 물 분자 사이에 많은 빈 공간을 남깁니다.
- 에탄올 분자는 물 분자보다 작습니다.
이 두 가지 요인은 물과 에탄올을 섞을 때 에탄올 분자가 물 분자 사이의 공간을 차지한다는 것을 의미합니다. 이것을 시각화하는 유용한 방법은 모래와 암석에 대해 생각하는 것입니다. 각각 1리터를 섞는다면 모래가 암석 사이에 떨어지기 때문에 최종 부피 2리터를 얻지 못할 것입니다.
수소 결합 및 쌍극자-쌍극자 상호 작용을 포함하여 상당한 분자간 힘도 존재하지만 이는 다른 날의 이야기입니다. 일상적인 실험실 생활에서 유체 부피(예: 액체 및 기체)가 항상 추가되는 것은 아니며 부피가 사라질 수 있다는 점만 기억하면 됩니다.
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